پاورپوینت كنترل كيفي آزمايشگاه ميكروب شناسي (pptx) 78 اسلاید
دسته بندی : پاورپوینت
نوع فایل : PowerPoint (.pptx) ( قابل ویرایش و آماده پرینت )
تعداد اسلاید: 78 اسلاید
قسمتی از متن PowerPoint (.pptx) :
موضوع :
كنترل كيفي آزمايشگاه ميكروب شناسي
تهيه و کنترل کیفیت محیط های کشت
نکات عمومی در مورد محیط های کشت:
آب:
کیفیت محیط های کشت بطور مستقیم بستگی به کیفیت مواد خام مورد استفاده در تهیه آنها دارد. آب یکی از مهمترین موادی است که در تهیه محیط های کشت بکار میرود. سه معیار مهم برای آب مورد استفاده در تهیه محیط های كشت شامل وجود یونهای مس، قدرت هدایت الکتریکی و pH می باشد. در شرایط ایده آل یونهای مس بدليل خاصیت مهارکنندگی برای اغلب میکروارگانیسم ها نباید در آب مورد استفاده جهت تهیه محیط های کشت وجود داشته باشد. قدرت هدایت الکتریکی آب باید کمتر از 15 میکرو زیمنس باشد وهمچنینpH آب مورد استفاده بهتر است کمی اسیدی باشد ولی نباید کمتر از 5/5 باشد.
توزين محيط کشت و افزودن آب:
طبق دستورالعمل تهيه محيط کشت که بر روي قوطي نصب گرديده است، مقدار مناسبي از پودر محيط کشت را با دقت وزن نماييد. ظرف محيط کشت را دور از کوران هوا و رطوبت باز کنيد. از استنشاق پودرها به خصوص آنهايي که داراي مواد سمي هستند و تماس طولاني مدت آنها با پوست اجتناب کنيد. پودر را به سرعت، به دقت و بدون ايجاد توده اي از غبار وزن کنيد. هرچه زودتر درب ظرف را ببنديد.
نصف حجم آب مورد نياز را داخل ظرف بريزيد. سپس مقدار وزن شده محيط کشت را به آن اضافه نماييد. براي چند دقيقه به تندي تکان دهيد. باقيمانده آب را به ديواره ظرف بريزيد تا ذرات محيط کشت چسبيده به ديواره نيز وارد محلول شوند. اين مرحله بسيار مهم است، چون پودر خشک محيط کشت در بالاي سطح آب، ممکن است در اتوکلاو استريل نشود و منبع آلودگي گردد.
حل کردن محيط کشت:
محيط هاي کشت بدون آگار، معمولا با تکان دادن آهسته و ملايم حل خواهند شد. اما محيط هاي کشت حاوي آگار بايد قبل از حرارت دادن به مدت چند دقيقه با آب مخلوط شوند. سپس حرارت داده شوند تا آگار قبل از اتوکلاو کردن، حل شود. محيط هاي کشت را بجوشانيد بدون آنکه بسوزند.
محيط هاي کشتي که نبايد اتوکلاو شوند، بعد از اين مقدار حرارت دادن، براي تقسيم داخل پليت ها يا ظروف ديگر آماده خواهند بود. اکثر محيط هاي کشت به استريليزاسيون نهايي (در دماي C °121 به مدت 15 دقيقه) نياز خواهند داشت.
اندازه گيري و تنظيم pH:
محيط هاي کشت دهيدراته اگر بطور مناسب تهيه شوند نيازي به تنظيم pH ندارند.pH نهايي محصول استريل شده را مي توان روي پليت يا بطري اندازه گيري کرد، اما بايد آنها را بعد از سنجش pH دور ريخت. بنابراين بعد از استريل شدن و خنک شدن محيط کشت تا دماي C °25، مقدار pHرا در حد مورد نظر (2/0 ±) تنظيم نماييد. تنظيم pH معمولا با استفاده از هيدروکسيد سديم 40 گرم در ليتر (تقريبا" يک مولار) و يا با استفاده از اسيد کلريدريک 5/36 گرم در ليتر (تقريبا" يک مولار) انجام مي شود.
توزيع:
محيط کشت را در ظرفي مناسب با حجم 2 تا 3 برابر حجم محيط کشت بريزيد تا بتوانيد آنرا به خوبي تکان دهيد و مخلوط کنيد.
استريليزاسيون:
بعضي از محيط هاي کشت به استريليزاسيون با اتوکلاو احتياجي نداشته و با جوشاندن استريل مي شوند که دستور ساخت آنها بر روي برچسب قوطي محيط کشت قيد گرديده است. استريليزاسيون ساير محيط هاي کشت توسط حرارت مرطوب يا صافي غشايي انجام مي گردد که اين موارد نيز بر روي بر چسب قوطي محيط کشت قيد گرديده است.
الف) استريليزاسيون با حرارت مرطوب:
استريليزاسيون محيط کشت تا حجم يک ليتر، در اتوکلاو به مدت 15 دقيقه و در دماي C °121 (فشار 2/1 کيلوگرم بر سانتيمترمربع) انجام مي گيرد. براي حجم هاي بيشتر از يک ليتر بايد چرخه استريليزاسيون را بطور مناسب تغيير داد. اما چون اکثر مشکلات در استريليزاسيون محيط هاي کشت وقتي رخ ميدهد که مقادير بيشتر از دو ليتر محيط کشت بايد استريل شود، لذا توصيه مي شود که مقادير زياد محيط کشت را در حجم هاي کوچکتر تقسيم نماييد.