پاورپوینت آنالیز اسیدهای نوکلئیک (pptx) 25 اسلاید
دسته بندی : پاورپوینت
نوع فایل : PowerPoint (.pptx) ( قابل ویرایش و آماده پرینت )
تعداد اسلاید: 25 اسلاید
قسمتی از متن PowerPoint (.pptx) :
آنالیز اسیدهای نوکلئیک
انواع آنزیمهای محدودکننده
آنزیم های تولید کننده انتهای چسبان
(sticky end)
3’ Overhang
5’ Overhang
آنزیم های تولید کننده انتهای صاف
(blunt end)
2
پروب
توالی
DNA
و یا
RNA
توالی مکمل ناحیه خاصی از ژنوم
متصل به یک برچسب (نشاندار)
قابل ردیابی
ساترن بلات
آنالیز ساختمان ملکلولهای
DNA
بر اساس اندازه
جداسازی مقادیر زیاد
DNA
10
8
گلبول سفید = 100-50 میکروگرم
DNA
برش
DNA
توسط آنزیم محدودالاثر
الکتروفورز بر روی ژل آگارز
انتقال رشته های
DNA
بر روی غشاء نیتروسلولز
دناتوره کردن
DNA
اضافه کردن پروب
هیبریداسیون
ردیابی (ظهور علامت ملکولی)
Southern Blot
Southern Blot
Southern Blot
کاربردهای ساترن بلات
روش استاندارد برای تشخیص جهشهای ژنی
خصوصا جهشهایی که منجر به حذف یا اضافه شدن های بزرگ می شود
معایب
وقت گیر
نیازمند مقادیر بسیار زیاد
DNA
ناکارامد در تشخیص جهشهای نقطه ای
استفاده از پروب های رادیواکتیو
آنالیز با پروبهای اولیگونوکلئوتیدی اختصاصی آلل
(ASO)
قابل استفاده در طیف وسیعی از جهشهای ملکولی
استفاده از اولیگونوکلئوتیدهای کوتاه سنتتیک
معمولا با استفاده از فاز جامد استفاده می شود
واکنش زنجیره ای پلیمراز
حل مشکل نیاز تکنیک ساترن بلات به مقادیر زیاد
DNA
تولید مقادیر نامحدود از یک توالی خاص
DNA
تکثیر اختصاصی یک توالی حاوی جهش
سرعت بالای واکنش
توانایی بررسی مقادیر بسیار کم
RNA
Reverse transcriptase PCR
بررسی کمی ملکولهای
DNA
و یا
RNA